今(11)日，圖爾思集團(BIOTOOLS)攜手大昌華嘉(DKSH)舉辦全臺首場「Exosome解泌實作坊」，會中除了介紹胞外囊泡(EVs)及外泌體(exosome)的最新研究趨勢與應用、現場演示儀器及設備操作外，也邀請到跨國設備商莎多利斯(Sartorius)，分享工業級切向流過濾(TFF)系統的專業知識。


圖爾思集團攜手大昌華嘉舉辦全臺首場「Exosome解泌實作坊」，現場觀眾參與踴躍。 (攝影/巫芝岳)
 

奈米流式檢測儀高靈敏度、分辨率 成外泌體早期診斷、藥物開發、先進療法研發利器

大昌華嘉科學儀器事業部資深應用工程師Roy Chen (攝影/巫芝岳)

活動首先由大昌華嘉科學儀器事業部資深應用工程師Roy Chen，介紹廈門福流(Nanofcm)公司所開發的奈米流式檢測儀。他表示，此款儀器能夠針對7-1000奈米大小的奈米顆粒，實現具即時性(real-time)的單一顆粒檢測，且在側向散射及螢光偵檢上，皆獲得極高的靈敏度及分辨率，彰顯其在粒徑、濃度、均一性、純度、蛋白表現、核酸的分析能力。

Roy Chen表示，目前針對外泌體常用研究技術，包含了冷凍穿透式電子顯微鏡(Cryo-EM)、奈米孔技術(TRPS)、奈米顆粒追蹤(NTA)等，但各有其侷限性，而此款奈米流式檢測儀結合了這些技術的優點，可應用在純化方法、疾病診斷、再生醫療、藥物載體等面向中。

他也說明，奈米流式檢測儀能夠應用在慢病毒(lentivirus)、核酸藥、疫苗及外泌體(exosome)的研發解決方案中。具體研究案例，包括了Codiak公司所開發的全球首款進入臨床試驗之工程化外泌體候選藥物；利用結直腸癌患者外泌體會過量表達CD147表面蛋白作為預防醫學的應用；利用胞外囊泡，提高醫美手術脂肪移植成功率的研究等。

此外，奈米流式檢測儀也能應用在先進療法中，例如細胞及基因療法常用的慢病毒載體，可透過測定核酸和病毒表面的VSV-G蛋白，識別並量化病毒的濃度；或是在開發核酸藥過程中，精準測量包封率(loading efficiency)、滿殼率(loading fraction)、空殼率等，評估奈米脂質微粒包裹效率。

國際外泌體指引逐步建立！圖爾思提供標準化一條龍整合分析服務

圖爾思生命科學部產品副理Sam Hsiao (攝影/巫芝岳)

圖爾思生命科學部產品副理Sam Hsiao，則以外泌體從核酸到蛋白的分析檢測平台為題演講。他表示，外泌體相關研究逐年增加，在2022年已達5207篇，應用的面向包括診斷、藥物遞送及療法、免疫調節、再生醫療等；於此同時，外泌體相關的規範也陸續建立，例如國際胞外囊泡協會(ISEV)在2018年匯聚400多位科學家意見、提出的共識倡議「胞外囊泡及其功能定義的最低實驗要求」(MISEV2018)，即針對EV命名法、樣品收集和預處理、EV分離和濃縮、表徵、功能研究和報告要求等六個廣泛主題中提出建議。

Sam Hsiao表示，目前圖爾思集團也針對外泌體的研究需求，整合了Hansa BioMed、圖爾思生技及安鑫生技的產品服務，為客戶提供一條龍的外泌體整合分析解決方案，包含了針對不同粒徑的外泌體之分離試劑組、表徵定義(characterization)及品質控制(QC)、高通量內含物分析(例如蛋白體學、單外泌體分析、miRNA之RT-PCR等)等。

演講後，主辦單位也於現場演示奈米流式檢測儀的分析介面、產出數據報告，以及TFF濃縮管柱實驗操作流程等，獲得現場與會聽眾熱烈詢問。

TFF提升外泌體純化效率 多規格耗材/機台助研發、製程放大

莎多利斯產品專員Ivy Chuang (攝影/巫芝岳)

莎多利斯產品經理Ivy Chuang，接著詳細介紹了外泌體純化時所使用的TFF技術。TFF是一項運用分子大小進行純化，可在樣本上分析儀前，提高樣品純度的過濾工具。她表示，相較於最傳統的濾餅過濾(dead-end filtration)方式，TFF是運用改良過後的「切向流過濾」(crossflow filtration)原理，藉由樣品在過濾膜表面的流動，減少分子積聚在膜表面的量，來提高過濾效率。

而目前常見的TFF工具，包括有吸管狀的中空纖維(hollow fiber)，和層狀的卡匣(cassette)兩大形式；過濾系統中，則包括：裝填樣品的樣本槽(feed tank)、幫浦、過濾膜等構造，以壓力為驅動力，讓樣本在系統進行過濾循環和液體置換，最終取得純化後的濃縮樣本。

Ivy Chuang說明，在放大製程時，可依不同樣本量選擇耗材與大小機台，且在不同規模樣本操作時的參數調校也相當方便，例如在卡匣系統中，因為不同通量卡匣液體流通過的「高度」皆相同，所以可直接將數值線性放大。

除了多項過濾耗材外，莎多利斯目前的TFF系統包括：用於前期小量研發的Sartoflow® Smart (適用於250毫升~5公升液體)，以及用於小量、臨床前製程的Sartoflow® Advanced (適用於35~105公升液體)等。對於更大量的製程需求，公司則提供「Intergrated Solutions」(InSo)服務，以客製化方式建造全自通化的系統。

(報導/吳培安、巫芝岳)