《Science》突破基因療法載體限制！StitchR DMD療法體內重建全長RNA
 
美國時間14日，美國羅徹斯特大學研究團隊發表Stitch RNA (StitchR)無疤RNA轉連接技術，利用核酶(ribozyme)從兩個獨立的腺相關病毒(AAV)載體中，重建單一蛋白質編碼mRNA，治療因突變區位過大而無法裝載至單一AAV顆粒的疾病。研究團隊利用此技術，將大型治療性肌肉蛋白(large therapeutic muscle protein)，包含質膜修復蛋白(dysferlin)和肌失養蛋白(dystrophin)，恢復至內源性表現量(endogenous level)。該研究刊登於《Science》。
 
StitchR技術源於細胞修復被核酶切割RNA的天然能力。核酶切割後留下2’,3’-磷酸化(2’,3’-phosphate)與5’-羥基末端(5’-hydroxyl termini)標記，使細胞可辨識並重新拼接片段，最終生成全長蛋白質，達成基因修復。
 
StitchR基因療法利用兩種AAV載體分別攜帶質膜修復蛋白或肌失養蛋白基因半段。基因轉錄後，核酶切斷留下標記，使細胞啟動修復，拼接出完整mRNA，再轉譯成功能性蛋白，治療裘馨氏肌肉失養症(DMD)。
 
研究團隊表示哺乳動物細胞中優化StitchR活性後，蛋白質表現提高約900倍，接近單一載體的表現量。
 
DMD是一種遺傳疾病，常發於男性，因X染色體異常導致DMD基因缺失，無法生成肌失養蛋白，使肌纖維膜脆弱，進而引發肌肉退化與萎縮。
 
論文通訊作者、羅徹斯特大學醫學和牙科學院的細胞生物學家Douglas M. Anderson表示，目前僅有StitchR技術能提供全長DMD基因的副本拷貝，其他方法無法達成。他進一步透露，該技術已授權給中國北海康成製藥公司(CANbridge Pharmaceuticals)，該公司專注於罕見疾病治療。
 
目前，DMD基因治療技術，如Sarepta Therapeutics的Elevidys，利用「微抗肌營養不良蛋白」(microdystrophin)基因副本治療DMD，已於今年六月獲美國FDA批准擴展適應症。
 
然而，今年七月，輝瑞(Pfizer)放棄其DMD基因療法候選藥物，因臨床三期試驗失敗，導致裁員。此外，Dyne Therapeutics在臨床一二期試驗中出現嚴重副作用，三名高層因此辭職。
 
參考資料: https://www.fiercebiotech.com/research/muscular-dystrophy-gene-therapy-delivers-mrna-strands-mouse-muscle-cells-and-lets-cells
論文: https://www.science.org/doi/10.1126/science.adp8179
 
(編譯/黃佳啟)